血細胞分析報告(收藏18篇)

血細胞分析報告(收藏18篇)。

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通過癌細胞和正常 細胞的比較，學會比較分析，通過討論癌癥案例解析，提高應用理論知識解決實際生活問題的能力。

3、情感態度與價值觀目標：

通過討論癌癥如何防治和如何選擇健康的生活方式，確立積極的生活態度和健康的生活方式。養成不 吸煙、不酗酒的良好行為習慣，樹立正確的公民道德觀

(1)、癌細胞的主要特征。

導入新課，

合作探究 ，

癌細胞主要特征?

致癌因子和致癌機理?

展示點評，

癌細胞主要特征?

(3)癌細胞的表面發生了變化。由于細胞膜上的糖蛋白等物質減少，使得癌細胞彼此之間的黏著性顯著降低，容易在體內分散和轉移。

2、致癌因子和致癌機理?

(2).化學致癌因子：無機物如石棉、砷化物、鉻化物、鎘化物等;有機物如黃曲霉毒素、亞硝胺等。

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教學目標：

1、需氧呼吸和厭氧呼吸的過程及異同

2、細胞呼吸的意義及其在生產和生活中的應用

教學重點：

1、需氧呼吸和厭氧呼吸的過程及異同

教學難點：

1、需氧呼吸和厭氧呼吸的過程及異同

教學課時：2課時

教學過程：

導課：生物界所有生物的一切生命活動都需要能量。無論是聰明絕頂的人類還是肉眼難尋的細菌，如果能量供應一旦停止，生命也將結束。那么，生物體內是通過什么方式來產生和提供能量的呢?

學生：細胞呼吸

老師：非常好，提到能量兩個字，讓我們想起之前給大家歸納的四大能源

光能----是生命活動的最終能量來源

光能轉變為有機物中穩定的化學能是通過植物的什么作用完成的？

學生：光合作用

老師：有機物中的能源物質主要指糖類和脂質

糖類是生命活動的物質

學生：主要能源

脂肪是生物體的物質

學生：儲能

老師：這些有機物中的能量不能直接用于生命活動，必須轉換成

能量通貨“ATP”才能直接用于各項生命活動。ATP是生命活動的直接能源

老師：有機物中穩定的化學能是通過什么生理活動轉換成ATP中活躍化學能的？學生：細胞呼吸

一細胞呼吸

什么是細胞呼吸呢？包括哪些類型？

提問：呼吸作用的概念和類型？

學生通過閱讀教材明確基本概念。

細胞呼吸類型

提問：需氧呼吸怎樣進行？

（出示課件：展示需氧呼吸過程圖）由學生先自學需氧呼吸的三個階段，

提出問題要求分析并討論：

①需氧呼吸的生成物CO2和H2O分別產生于需氧呼吸的第幾階段？

②需氧呼吸的生成物CO2中的C和O分別來自哪里？需氧呼吸的生成物H2O中的O從何而來？

③需氧呼吸過程中哪幾個階段有[H]產生？其去向？

④需氧呼吸過程中哪幾個階段有ATP產生？最多的是哪一個階段？

⑤需氧呼吸過程中物質變化和能量變化的特點是什么？

⑥C6H12O6能否進入線粒體參與需氧呼吸？

再請學生講述，教師進行適當的引導和處理發現的問題，充分發揮了學生主體教師的主導作用；這樣既使學生積極參與到學習過程，又培養了學生的綜合分析能力.

教師再主要從以下幾個方面講解：需氧呼吸各階段的場所、各階段的物質變化和能量的釋放情況及反應式，線粒體是需氧呼吸的主要場所、細胞生命活動所需的能量大約95%來自線粒體的原因，以解決學生中的疑難。

展示：需氧呼吸三個階段的比較過程圖

請三位學生分別回答，獲得有效教學反饋信息.

討論：

總結需氧呼吸的概念和總反應式(關鍵詞：氧氣、酶、徹底、分解、大量)

通過以上處理，使得需氧呼吸呼復雜、抽象的過程變得形象、具體，既突出了重點，解決了難點，又培養了學生的綜合分析、概括能力。

需氧呼吸：細胞在氧的參與下，通過酶的催化作用，把糖類等有機物徹底氧化分解，產生二氧化碳和水，同時釋放大量能量的過程。

總反應式：

酶

C6H12O6+6H2O+6O2

2

+12H2O+能量

老師：蘋果、香蕉儲存久了，會有什么氣味散發出來？

學生回答：酒味。

老師：對，蘋果，香蕉厭氧呼吸產生了酒精。轉入厭氧呼吸的學習

展示：厭氧呼吸的概念及過程圖

提出要求：閱讀厭氧呼吸的概念及過程圖，自學厭氧呼吸過程、產物、能量的釋放、概念、發酵等，教師組織、提示、引導和歸納性總結。

學生學習完后教師提出問題：討論并分析

1、為什么厭氧呼吸所放出的能量要比需氧呼吸少得多？

2、為什么不同生物厭氧呼吸的產物不同？厭氧呼吸過程中，物質變化和能量變化的特點是什么？

3、厭氧呼吸和需氧呼吸有何異同？

展示：需氧呼吸與厭氧呼吸的比較

請學生分別回答，獲得有效教學反饋信息.

我們學習完了厭氧呼吸和需氧呼吸，那細胞呼吸有什么意義呢？

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細胞培養崗述職報告

尊敬的領導、各位同事：

大家好！我是XX細胞培養崗位的xx。在這里，我非常榮幸地向大家匯報一下我在細胞培養崗位上的工作情況。

一、崗位職責

作為細胞培養崗位的一員，我主要負責以下工作：

1. 細胞培養實驗：根據不同的實驗目的，我進行細胞的培養、傳代、劃分和收獲。通過嚴格遵守標準操作規程，確保細胞培養質量的穩定和可靠。

2. 培養基配制和消毒：負責培養基的配制和消毒工作，確保培養基的質量和無菌狀態。同時，也參與培養基的制備和優化工作，以滿足科研實驗的需要。

3. 實驗設備維護：定期對實驗設備進行檢修和維護，保證設備正常運行。及時報告并解決設備故障，提高設備的利用率和壽命。

4. 實驗數據統計和分析：負責實驗數據的記錄、整理和分析，并生成報告和圖表，以便向領導和科研團隊匯報實驗結果。同時，也參與團隊討論，為實驗設計和方案提供支持和建議。

5. 實驗室管理：參與實驗室的管理工作，包括實驗室環境的維護、實驗室安全管理、實驗材料的采購和庫存管理等。積極參與實驗室的團隊合作和知識共享，提高整個團隊的工作效率和科研水平。

二、工作總結

在過去的一年中，我始終積極努力地履行崗位職責，勤奮工作，努力提高自己的專業水平和工作效率。通過不斷學習和實踐，取得了一定的工作成績：

1. 細胞培養技術的熟練掌握：在細胞培養的過程中，我能夠熟練操作培養基的配制、細胞的傳代和細胞的分割等技術操作。同時，我也能夠根據實驗的需要進行細胞培養條件的優化，以提高實驗的成功率和效果。

2. 實驗設備的維護和管理：我經常對實驗設備進行檢修和維護，在設備故障時能夠及時解決問題，減少實驗中的干擾因素。此外，我也及時向領導報告實驗設備的使用情況和維修需求，以提高實驗設備的利用率和壽命。

3. 實驗數據的整理和分析：在實驗過程中，我準確記錄了實驗數據并進行了合理的統計和分析。根據分析結果，我能夠迅速提取有效信息，并向領導和科研團隊匯報實驗結果。通過與團隊成員的交流和討論，我能夠提出一些有效的建議和改進方案。

4. 實驗室管理的積極參與：我參與了實驗室的常規管理，爭取做到實驗室的整潔、無菌和安全。同時，我也根據實驗需要及時采購和管理實驗材料，確保實驗室的常規工作的順利進行。

三、思考與感悟

在細胞培養崗位工作的過程中，我不僅學到了很多專業知識和技能，更重要的是學會了如何團隊合作和解決問題。通過與同事們的協作和交流，我能夠進一步提高自己的工作效率和綜合能力，也學會了如何處理工作中的壓力和挑戰。

在細胞培養實驗中，時刻保持細心和耐心是非常重要的。只有準確細致地執行每一個步驟，才能保證實驗的成功。同時，細胞培養工作中還存在很多的挑戰和不確定因素，需要我們不斷學習和創新。因此，我將繼續深入學習和研究細胞培養的相關知識，不斷提高自己的專業水平，更好地為科研工作做出貢獻。

以上就是我的述職報告，謝謝大家的聆聽！我相信，在領導和各位同事的支持和指導下，我一定會在細胞培養崗位上繼續努力，取得更大的成績。

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【關鍵詞】 血細胞分析儀；質量控制；深刻體會

［關鍵詞］ 血細胞分析儀；質量控制；深刻體會

血細胞分析儀具有檢測快速、結果重復性好等優點，在提高了檢驗人員工作效率的同時為臨床疾病的診斷、治療提供了更多有價值的實驗數據，但在使用過程中如無完善的質量控制措施，檢驗結果的.準確性將受到影響。為確保血液分析結果的準確可靠，筆者在使用Poch100i血細胞分析儀過程中，全面做好分析前、分析中、分析后的質量控制，體會如下。

1　分析前的質量控制

1．1　做好標本的正確采集　用EDTAK2真空采血管采集靜脈血2.0 ml，采血時應一針見血，采血后要及時混勻，避免血小板聚集；當血液采集量不足1.5 ml時，EDTA的濃度達到2.5 g/L時，中性粒細胞腫脹、分葉消失，血小板腫脹、崩解、產生正常血小板大小的碎片；當采血量超過2.5 ml時，由于抗凝劑相對不足，血漿中出現微凝血塊的可能性增加，這些都將影響檢驗結果。血標本出現凝集或溶血時，應重新采集標本。

1.2　血液標本應盡可能在短時間內檢測　在室溫下，DETAK2抗凝靜脈血白細胞、紅細胞、血小板計數可穩定24 h，白細胞分類6 h內穩定，細胞形態2 h后即可發生變化，對于需要推片分類的標本應及時推片。

1．3　用于全血細胞分析的血液不能放置于冰箱中保存　標本不能及時測定應放置室溫下，并加蓋保存。若溫度過低，則溶血素與血細胞的作用力減低，使得白細胞分類計數結果不正確，也容易引起血小板聚集，導致血小板結果異常。

2　分析中的質量控制

2．1　確保儀器處于良好的工作狀態　每天開機后要檢查儀器是否正常，本底測試是否通過等，做好儀器的日常保養與維護工作，按Poch100i血細胞分析儀使用說明書，分別做好日、周、月保養，在大批量標本檢測時，每檢測20個～30個標本后，用自配的40％次氯酸鈉溶液按預稀釋模式當標本檢測，以沖洗管道，防止蛋白在管道中沉積，確保儀器運行正常。

2．2　選用配套試劑并檢查試劑質量　溶血素、稀釋液等一定要在有效期內使用。保證測試時試劑溫度在儀器要求的范圍內，低于15 ℃或高于30 ℃均對檢測結果有影響。

2．3　認真做好室內質控　本實驗室購買儀器配套進口定值質控物，每天和患者標本一起檢測，利用檢驗信息系統自動繪制質控圖，觀察質控物測定結果是否受控，如失控，認真查找失控原因，包括操作失誤，試劑、校準物、質控品失效、儀器維護不良等，發現問題及時加以解決，并分析判斷當天的結果是否可以發出。

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一、教材分析：

本單元是最貼近學生實際的，特別是秦文君的《偉人細胞》?！秱ト思毎愤x自小說《男生賈里》。共記述四件事：化敵為友，健美風波，打工計劃，領書事件。語言輕松活潑，詼諧幽默，是學生喜歡的文章。

（一）教學目標

1、理清文章思路，熟悉故事情節

2、學習本文巧妙安排故事情節的方法，了解人物鮮明的個性特征。

3、聯系生活實際，認識只有腳踏實地，從小事做起，才能成就一番偉大事業的道理。

（二）教學重點感受充滿個性的人物形象，在他身上“偉人細胞”體現在哪里。

（三）教學難點聯系生活實際，認識只有腳踏實地，從小事做起，才能成就一番偉大事業的道理。

二、學情分析：

學生對這篇文章的閱讀興趣非常濃厚。因為課文給了學生更多的自由活動空間，更多的發表個性化見解的空間。

三、教法學法：

（一）教法：充分體現教師是學習的組織者、引導者、激發者，學生是學習的主體。

（二）學法：積極倡導自主、合作、探究的學習方式，用朗讀、勾畫、討論、交流、點評等方式完成本文的教學目標。

四、課時安排與課前準備：

安排一課時。課前布置學生預習課文：

1、借助工具書整理字詞的音、義。

2、賈里為實現“偉人夢”計劃干了幾件大事？結果怎樣？

3、從中懂得了什么道理？

五、設計意圖及依據：

閱讀是學生的個性化行為，是一種高度個性化的心智活動。自讀課文的閱讀教學，應讓學生在主動積極的思維和情感的活動中，加深理解和體驗，在課堂上，有所感悟和思考，受到情感熏陶，獲得思想啟迪，享受審美樂趣。而學生語文素養的提高，有賴于課堂上的語文實踐。那么，如何實現提高語文素養與個性化閱讀之間的契合呢？現結合七年級自讀課文《偉人細胞》的教學設計加以闡述。

（一）課堂導入：大家熟悉的偉人有哪些？老師給大家找了幾幅偉人的圖片，你們想不想和他們成為一樣的人？今天我們要跟隨作家秦文君去認識一位也想成為偉人的初一男生賈里

（二）預習檢測

了解作者

本課應該掌握的生字詞

（三）整體感知：

1、賈里的偉人標準是什么？（豁達灑脫、旗幟鮮明、有恨有愛、轟轟烈烈）

2、賈里為了圓他的“偉人夢”他計劃作了哪些大事？結果怎樣？（用簡明的語言概括）通過講述故事了解情節，然后用一句話概括，再提出用四字短語概括。既有對內容的熟悉，又有語言的概括提煉。

（三）研讀課文：

1、賈里為實現偉人計劃所做的幾件事結果怎樣？他為什么會失??？為什么會成功？

2、從這個故事中，悟出什么道理？

3、你喜歡賈里嗎？賈里身上是不是真的具有偉人細胞？

4、做小事和成為偉人之間矛盾嗎？說說你的理解

這樣安排給學生有選擇的自由空間，有利于學生個性的發展。集體交流中又體現了合作學習的精神。

（四）能力拓展：賈里的初一生活算是暫告了一個段落，他的初二生活會是怎樣的呢？設計的“續寫初二的賈里”環節，能夠充分地發揮學生學習的自主性，讓他們在領略課文的主旨后，個性化的描繪賈里的未來。雖然在寫賈里，但是同學們將會更多地思考自己的未來，更想到自己身上存在的偉人細胞，要去成為偉人。寫作的過程就是學生情感思想收獲的過程。想象力的培養，創造力的發揮，課文內容的體驗，思想情感的教育，盡在這一個過程中。

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對-長江口親蟹汛期漁獲規格和捕撈量進行了研究,并對資源量和最大持續產量進行了估算.親蟹平均殼長、殼寬和體重分別為61 mm、66 mm和142 g,雌雄個體比例為1:2.16;同期親蟹年均捕撈量為2.03 t,最大持續產量參考值為1.06 t.研究期內親蟹個體規格差異過大,捕撈量變動劇烈且時間分布有前移趨勢,捕撈量相關因子的年間變動沒有顯著規律.此外,插網作業方式應予以禁止或限制,九段沙附近水域的捕撈強度也應得到有效控制.

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由于細胞結構微小，功能相對抽象，距離學生生活經驗較遠，在現有的課堂教學設備和時間的限制中，不可能完全通過學生自己解決所有的探究問題，特別是關于細胞生長和分裂的問題，相對于七年級學生已有的知識和能力基礎來說，進行自主、探究、合作的學習無疑是有一定的困難，所以這節課就需要教師作為幫助者的身份，協助學生學習。這節課主要通過精心編排視頻資料、幫助學生提出問題來降低知識的難度，幫助學生獲得成長。

本節一開始直接創設情境，導入教學，通過觀看生物體生長的視頻，根據視頻提出問題“植株為什么會由小長大？”激發學生的好奇心和探知欲。對于“生物體為什么會由小長大”“什么是細胞的生長”這一問題學生通過閱讀、自學就可了解?！凹毎芊駸o限制的長大”這個問題比較抽象，讓學生先分析、討論，對于學生給與的結果，教師不必評價，讓學生自己去驗證。通過對不同邊長的正方體表面積/體積之比的計算數據進行比較，再將正方體與細胞進行聯系，了解到細胞是不能無限制生長的，一部分細胞生長到一定的大小就開始進行分裂。（在此給學生點出一部分細胞分化后形成組織，一部分細胞死亡，為后邊的教學奠定基礎。）

細胞分裂是重點，要求學生能夠描述分裂的基本過程，教學中我將動植物細胞的分裂過程分開來講，先安排學生觀察flash動畫中植物細胞分裂的過程，培養學生動腦觀察的能力，然后結合教材小組合作，討論并準確描述“植物細胞分裂的過程”，了解到了植物細胞分裂的過程后，再播放動物細胞分裂的flash動畫，用同樣的方法，學生自己討論，分析他們的異同點，教師可畫圖、用手比劃點撥“動物細胞膜的凹陷、溢裂”鞏固學生的理解。通過多次描述，學生對動植物細胞的分裂有了全面的理解，教師進行小結后讓學生觀看高倍顯微鏡下的細胞分裂過程，鮮活的`視頻材料讓學生感受到科學的神奇，進一步加深細胞分裂可以產生新細胞并且使細胞數量增加的認識。關于“細胞分裂時染色體的變化”這一知識點，引導學生分析、討論細胞分裂時染色體可能產生的變化結果，依然讓學生自己解決自己描述。教師補充的同時需要強調染色體數量的加倍其實就是染色體的復制過程，正因為復制，才會形成完全相同的兩份。最后，通過視頻播放，將所學知識完整的連接起來使學生對本節課有一個整體的認識，再通過多媒體對本節知識進行羅列，使學生一目了然。

為了讓本節知識轉化成學生的能力，對學生進行技能訓練，老師出示相關的練習題，以鞏固本節的教學目標。

閱讀以及課外探究目的是讓學生產生新的疑問，培養學生對科學的興趣，激起學生進一步探究的欲望，使他們在探究的過程中，體驗學習的樂趣，增長科學探究能力，獲取科學知識，形成尊重事實、善于質疑的科學態度。幫助學生體驗科學活動的過程和方法，并在今后多關注、了解科學、技術與社會的關系，為后繼的科學學習、為其他學科的學習、為終身學習和全面發展打下基礎。

一、教法和學法指導：

1、指導閱讀和交流：教師提出問題，讓學生帶著問題有目的地精心思考，在學習過程中遇到困難，小組成員之間相互啟發討論，交流，擴大學生思維。取長補短。

2、指導歸納：在學完幾個知識點后，教師要引導學生發現并歸納知識的內在聯系，提升學生的理性思維。學生回憶學過的知識，將知識進行整理歸納。

二、說教學程序

學生發布資料學生閱讀

細胞的生長掛圖演示

細胞的分裂掛圖演示

討論分析

小結和練習

具體教學過程如下：

（一）、發布資料，導入新課：在課前已經收集有關的生物資料，上課前讓幾位同學上講臺盡量脫稿發布，在學生發布信息完后，提出問題：生物體為什么會長大呢？這樣由生活中的信息引出遺傳信息的概念。符合學生的認知特點。再設疑：那細胞分裂和生長的過程是怎樣的呢？問題的提出引發了學生迫切想知道答案的心理，這樣就創造了良好的開端，使學生進入學習狀態。

（二）、層層設疑，啟發思維，解決重點

為了發揮學生的主動性和積極性，解決重點，達到良好的教學效果，我采取了以下方法：首先設置懸念：細胞分裂和生長的過程是怎樣的呢？讓學生閱讀59頁，讓學生有初步的了解。然后用掛圖展示并講解細胞分離和生長的過程，啟發學生的思維，引導學生解決重點。要點和切入點：細胞分裂過程中染色體的變化。在識圖中先找中期細胞：染色體最清晰，再找前期和后期等。讓學生認識倒染色體的變化是細胞分裂中的重要特征。了解細胞分裂是一個邊續過程。次序：核分裂質分裂中間產生新細胞膜（植物細胞不要產生新細胞壁）。在分裂后當染色體形態與數目不變（意味著遺傳物質不變）

（三）、作業

進一步探究：細胞永遠具有分裂能力嗎？觀看大屏幕，加深對細胞分裂過程的理解。用自己的語言描述細胞分裂過程。

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近年來研究發現,EGCs 中參與很多重要的作用如:釋放神經活性物質(還原谷胱甘肽、ATP、15d-PGJ2),參與神經遞質的前體的'合成(L-精氨酸、谷氨酰胺合成酶、γ-氨基丁酸)和表達神經遞質受體(P2Y1,2,4 、α2-AR、mGLuR5、PAR1/2),隔離和降解細胞外神經活性物質(PEPT2、GAT2),參與神經膠質的活化與形成等,從而有助于神經元-膠質細胞的對話和神經傳遞.EGCs具有免疫特性[25],參與上皮屏障功能[13-17]和產生神經保護作用[26-27].

EGCs 在腸道介導的保護作用涉及不同的機制,包括:(1)谷胱甘肽依賴的途徑.在神經元的胞外環境,EGCS通過合成和釋放GSH調節的抗氧化反應(例如,清除 H2O2).在神經元的胞內環境,EGCS 通過介導的部分 L-PGDS 和釋放 15d-PGJ2,增加了 Nrf2和GCLC的釋放表達,從而提高腸神經元GSH水平的表達.因此,EGCS直接或間接作用在腸道神經元調節中發揮核心作用.(2) EGCS 釋放腸道保護介質GDNF,通過磷脂酰肌醇-3-激酶/絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶介導的 (PI3K/AKT)減少細胞凋亡.(3)EGCS 在細胞外環境阻礙興奮性毒性去除 GABA 和Glu,通過不同的轉運蛋白(GAT2;GLT1)去除 GABA和Glu[28]. 此后,谷氨酰胺合成酶(GS)在 EGCS轉換為谷氨酰胺谷氨酸 (Gln),與半胱氨酸谷胱甘肽酶底物通過 GCLC.最后,GABA 能被轉化為谷氨酸GABA 轉氨酶,參與神經遞質前體的合成.

近幾十年來的研究通過體內和體外實驗來證實EGCs 在神經元的保護作用.在體內研究中,在轉基因小鼠敲除EGCs引發爆發性回腸炎,其聯合產生機制可能是由于腸道運動受損(神經元丟失)、上皮細胞屏障的改變(EGCS直接敲除)和內腔的因素(如細菌過度生長)[29].在GFAP-HA,CL4-TCR基因改造模型中,EGCs的選擇性凋亡通過腸道炎癥機制參與CD8+T 細胞介導的細胞毒免疫反應[30].在線粒體轉錄因子 A 基因敲除動物模型(TFAM),類似于人類假性腸梗阻,發生嚴重的腸道運動功能障礙與隨之發生腸道神經元和EGCs的缺失.提示線粒體功能障礙在神經元和膠質細胞變性中起到了主要的作用[31].

這些研究結果表明,神經膠質細胞在調節ENS的可塑性和功能的發揮重要的作用.體外研究中,在神經元細胞系與EGCs的共培養模型中,用腺病毒轉染大鼠的腸神經系統,腸神經元的特異性烯醇化酶的釋放顯著增加,并減少胡陽性神經元的表達.確定的GFAP和SOX10標記的EGCs出現了混亂和缺失[32].這些數據表明EGCs參與了神經的形成與存活.EGCs釋放的多種營養因子在神經元發育、存活和分化中起著重要的神經保護作用.EGCs介導多元化的保護機制在腸道中起著神經保護的作用.

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中華絨螯蟹循環血液中血細胞總數為(13357±7196) cells?mm-3,其中大顆粒細胞所占(49.8±7.5)%,其長軸(16.6±1.1) μm,短軸(10.2±0.6) μm;大小顆粒中間型細胞所占比例(20.6±5.3)%,其長軸(13.1±1.2) μm,短軸(8.4±0.5) μm;小顆粒細胞所占比例(29.3±4.8)%,其長軸(12.4±1.2) μm,短軸(8.1±0.4) μm;無顆粒細胞所占比例(0.2±0.2)%,其長軸(11.3±1.3) μm,短軸(8.9±1.1) μm.血液離體后,在血液完全凝固的(97.7±25.3) s時間內,只有無顆粒細胞和小顆粒細胞形態結構發生變化,細胞及其胞核立即膨大,核質比迅速增大,細胞膜破損崩解,胞漿溢出,血液完全凝固后這些細胞形態結構繼續變化,主要表現為胞質內線粒體、內質網等細胞器擴張溶解消失,小顆粒細胞中的小顆粒內含物滲出或溢出,顆粒空泡化或崩解,細胞核固縮等變化過程 .而大小顆粒中間型細胞和大顆粒細胞形態結構的.變化明顯慢于前兩種血細胞,在細胞離體后5 min時,細胞和細胞核才開始出現膨大,并逐漸出現細胞膜、線粒體、內質網溶解消失,顆?？张莼虮澜庖约凹毎斯炭s等形態結構的變化.從血液離體后血細胞形態結構隨時間變化的特點,推測無顆粒細胞和小顆粒細胞可能類似于脊椎動物的血小板,通過釋放胞內凝血物質參與血凝的級聯反應.

張明輝,ZHANG Ming-hui(上海市水產研究所,上海,33)

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教學目標：

１、能用簡潔的語言概括事件。

２、談談對賈里的印象。

教學內容、學生狀況分析及課前準備：

本文通過記敘初一學生賈里為實現“偉人計劃”而經歷的三次失敗及一次不經意成功的曲折過程，說明必須從小事做起方能干成大事的道理，人物形象鮮明、語言風趣、材料真實。

本文較長，學生課前應充分預習。

主要教學理念及選用的教學方法（含輔助教學手段）：

１、提倡自主、合作、探究的學習方式，努力建設開放而有活力的語文課程。

２、輔助教學手段：運用多媒體教學。

教學過程設計：

一、導入新課

（學生談自己的理想），不只有沒有同學想當偉人，（學生反應），有一個人就（也）想當偉人。今天，我們就來看看，它是怎樣實現他的偉人計劃的。

＜出示課題及作者＞

二、出示教學目標

三、初讀課文

學生速讀課文，圈出不會讀和讀不準的字。

小組釋疑。

全班交流。

教師檢查。

＜出示注音練習＞

學生指讀，全班齊讀。

四、研讀課文，概括事件

１、學生自讀課文，思考文中寫了幾件事，試著用最簡潔的語言概括出來。

２、小組討論。

３、全班交流，教師點撥。

＜板書＞ 化敵為友

矮個風度

打工失敗

分書成功

五、談談對賈里的印象

１、賈里做了這么多事，大家想不想認識他？（學生回答）

＜出事賈里的圖像＞

２、讀日記，思考、回答：賈里認為自己怎么樣？（很有偉人素質）

３、釋題 “細胞”是什么意思？ （素質）

４、人體內的細胞是看不見的，老師用顯微鏡把賈里的這幾個細胞放大，讓大家看清楚，他一定很高興的。

＜展示：賈里圖像上方出現三個細胞，各寫著：“才智不凡”、“愛憎分明”、“勇往直前”。＞

可是別人不這么看他，連最好的朋友也說：“你既不是偉人，也不是庸人?！蹦銈冋J為賈里是什么樣的人？

５、小組討論

６、全班交流

六、小結，布置作業

填寫表格

事件目標結果自我感受原因

學生學習水平多元化目標評價（含教學目標檢測）

１、為體現學生自主、合作的學習方式，本節課安排兩次小組活動，注意采取自我評價、互相評價和教師評價相結合的方式激勵學生。

２、理解字詞是學習語文的基礎，為此，本屆課安排注音訓練。

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選用平均體重為75.24g的中華絨螯蟹為試驗對象,分別投喂添加蚯蚓粉、BGB破壁酵母粉、DMPT作為誘食劑的`飼料,進行誘食試驗,通過測定日攝食率和攝食速度,比較其對中華絨螯蟹的誘食效果.結果顯示:中華絨螯蟹對含蚯蚓粉、BGB破壁酵母粉、DMPT飼料的日攝食率平均分別為3.7475%、3.0542%、2.6632%,與對照組差異顯著(P<0.05),試驗結果表明,蚯蚓粉、BGB破壁酵母粉對中華絨螯蟹均具較好的誘食效果,與DMPT比較,蚯蚓粉對中華絨螯蟹引誘作用最強,BGB破壁酵母粉次之.

周鑫,蔡云霞,ZHOU Xin,CAI Yun-xia(南京農業大學無錫漁業學院,江蘇,無錫,214081)

? 血細胞分析報告 ?

教學目標：

1．借助工具書或相互合作，掌握字詞。

2．梳理故事情節，分析賈里形象。

3．感悟平凡和偉大的關系。

教學重點：

梳理故事情節，分析賈里形象。

教學難點：

感悟平凡和偉大的關系。

教學過程：

初備統復備

?述職報告之家爆款精選:
• 試卷分析報告?|?季度分析報告?|?宣傳頭盔標語收藏?|?思想分析報告?|?血細胞分析報告?|?血細胞分析報告

一、導入新課：

每個人都希望自己成為名人，成為偉人。同學們有沒有這個愿望？那么，怎樣才能成為偉人呢？可能每個人的觀點不一樣。今天，我們一起來學習《偉人細胞》，看看文中是怎樣說的。（板書：偉人細胞）

理解“細胞”一詞的意思。

二、信息反饋：

1．檢查字詞預習情況

可以用“成語積累小擂臺”等形式來組織

2．交流梳理的情節結構，并組織評價。

三、分段復述課文。

1．結合前一環節理清復述思路。

化敵為友

矮個風度

打工風波

領破書成名

2．分組復述后指名復述故事，再組織評價

四、分析人物形象，體會故事中蘊涵的道理。

1．出示討論話題，組織交流：

（1）你覺得賈里是一個怎樣的人？你覺得他身上有沒有“偉人細胞”？

（2）賈里的偉人計劃成功了嗎？

（3）文中能起畫龍點睛的是哪句話？如果你是賈里的父親，你會對他說什么？

2．引導學生質疑：

【備】

（1）我提的問題是：看來，我是個普通人，只配做些雞毛蒜皮的小事?！蹦阏J為賈里說的這句話對嗎？為什么？

（2）正文之前引用了一段賈里日記，有什么作用？

（3）本文語言有什么特色？這樣的語言風格有什么樣的表達效果？

3．課堂活動：

我們同學來當一回小教師。每個同學圍繞這篇課文出一道練習題考考別的同學，題目的內容形式不限，但自己心中要有答案。大家思考一下，我把紙片發下去。同學們把題目寫在紙片上，并寫上自己的學號，然后把紙片折疊起來。

（收好紙條后，走到學生中間，讓學生抽簽答題，由出題人判斷正誤）

五、拓展深化

1．交流或推薦一些論述“平凡”與“偉大”的關系的格言警句。

2．布置辯論題目：

雷鋒和毛澤東，誰更偉大？

六、課堂練習

教學后記

? 血細胞分析報告 ?

篇1：實時定量PCR分析外周血白細胞的端粒長度<\/h2>

目的 采用一種新的簡便的`測定端粒DNA相對長度的方法一實時熒光定量PCR法,研究其可行性.方法 分別取40～49歲和60～69歲的健康男性外周靜脈血各12例,提取DNA后,采用實時熒光定量PCK對兩組受試者外周血白細胞的端粒長度進行檢測.結果 40～49歲組的受檢者外周血白細胞端拉長于60～69歲組.結論 隨著年齡增加健康人外周血白細胞的端拉長度縮短,實時熒光定量PCK洲定端拉長度的方法可行.

作 者：郭令軍 張七一 GUO Lingjiun ZHANG Qiyi ?作者單位：青島大學附屬青島市立醫院心臟內科,山東青島,266011?刊 名：中外醫療?英文刊名：CHINA FOREIGN MEDICAL TREATMENT?年，卷：?27?分類號：Q55?關鍵詞：端拉長度 ??實時熒光定量PCK ??外周血白細胞 ?

篇2：實時定量PCR分析健康人外周血線粒體DNA 4 977 bp缺失<\/h2>

實時定量PCR分析健康人外周血線粒體DNA 4 977 bp缺失

目的:用實時定量PCR方法分析健康人外周血線粒體DNA 4 977 bp的缺失情況.方法:收集27例年齡在17～44歲的健康人外周血,用熒光實時定量PCR方法對每個樣品同時檢測線粒體DNA 4 977 bp缺失的量和無4 977 bp缺失的量,進行定量分析.結果:在27例健康人外周血樣品中,線粒體DNA 4 977 bp缺失的陽性率為70.37%;19例有線粒體DNA 4 977 bp缺失的樣品,其擴增產物的CT值在第35個循環到第39個循環之間;無線粒體DNA 4 977 bp缺失的擴增產物的CT值在第15個循環到第21個循環之間;不同年齡組間線粒體DNA 4 977 bp缺失和無線粒體DNA4 977 bp缺失的`量均無統計學差異.結論:本文中超過2/3的健康人外周血含有線粒體DNA 4 977 bp的缺失;在有該缺失的樣品中大約每106～107拷貝中攜帶有一個線粒體DNA 4 977 bp缺失;隨年齡的增長外周血中線粒體DNA 4 977 bp的缺失未顯示出累積現象.

作 者：陳曉培 王平趙陽輝 韓林 王喜愛 呂玉民 Chen Xiao-pei Wang Ping Zhao Yang-hui Han Lin Wang Xi-ai Lv Yu-min ?作者單位：陳曉培,趙陽輝,呂玉民,Chen Xiao-pei,Zhao Yang-hui,Lv Yu-min

王平,韓林,王喜愛,Wang Ping,Han Lin,Wang Xi-ai

刊 名：中國衛生檢驗雜志? ISTIC英文刊名：CHINESE JOURNAL OF HEALTH LABORATORY TECHNOLOGY?年，卷：?17?分類號：Q7?關鍵詞：線粒體DNA ??4 977 bp缺失 ??年齡 ??實時定量PCR ?

篇3：實時熒光定量PCR技術綜述<\/h2>

實時熒光定量PCR技術綜述

實時熒光定量PCR技術是在PCR技術基礎上發展起來的.一種高度靈敏的核酸定量技術.與傳統PCR相比,實時定量PCR能夠更加快速、靈敏,并有效地對核酸進行定量檢測.

作 者：鄧文星 張映 Deng Wenxing Zhang Ying ?作者單位：山西農業大學動物科技學院,太谷,030801?刊 名：生物技術通報? PKU英文刊名：BIOTECHNOLOGY BULLETIN?年，卷：2007?“”?分類號：Q5?關鍵詞：實時熒光定量PCR ??標準曲線 ?

篇4：實時熒光定量PCR技術及其應用<\/h2>

實時熒光定量PCR技術及其應用

實時熒光定量PCR技術是一種多色熒光檢測核酸定量技術,該文簡要介紹實時熒光定量PCR技術的原理及其應用.

作 者：歐陽松應 楊冬 歐陽紅生 馬鶴雯 ?作者單位：解放軍軍需大學軍事獸醫系,長春,130062?刊 名：生命的化學? ISTIC PKU英文刊名：CHEMISTRY OF LIFE?年，卷：?24?分類號：Q52?關鍵詞：實時熒光定量PCR ??基因 ??熒光探針 ??SYBR Green ?

篇5：實時熒光定量PCR 技術的原理及其應用研究進展<\/h2>

實時熒光定量PCR 技術的原理及其應用研究進展

自從 1983 年 Mullis 發明聚合酶鏈式反應以來,PCR 技術很快成為科研、臨床診斷的'熱點技術.但是傳統PCR 技術在應用中一是不能準確定量,二是容易交叉污染,產生假陽性.

作 者：趙煥英 包金風 ?作者單位：首都醫科大學北京神經科學研究所,北京市神經再生修復重點實驗室,教育部神經變性病重點實驗室,北京,100069?刊 名：中國組織化學與細胞化學雜志? ISTIC英文刊名：CHINESE JOURNAL OF HISTOCHEMISTRY AND CYTOCHEMISTRY?年，卷：?16?分類號：Q523.1?關鍵詞：實時熒光定量PCR ??熒光標記探針 ??DNA 結合染料 ?

篇6：實時定量PCR檢測擬南芥和鹽芥谷胱甘肽過氧化物酶表達水平<\/h2>

實時定量PCR檢測擬南芥和鹽芥谷胱甘肽過氧化物酶表達水平

綜述了GPX在植物抗氧化脅迫中的'功能,并利用實時定量PCR試驗證明GPX在鹽脅迫下表達水平的改變.

作 者：趙寶添 孫娜娜 馬志媛 譚偉杰 ?作者單位：山東師范大學生命科學學院,山東濟南,250014?刊 名：現代農業科技?英文刊名：XIANDAI NONGYE KEJI?年，卷：?“”?分類號：Q946.5?關鍵詞：實時定量PCR ??擬南芥 ??鹽芥 ??谷胱甘肽過氧化物酶 ??檢測 ?

篇7：人GABRA1實時熒光定量TaqMan PCR檢測方法的建立<\/h2>

人GABRA1實時熒光定量TaqMan PCR檢測方法的建立

根據GenBank上人GABRA1基因的序列,設計并合成特異性的引物及探針,采用TaqMan探針法建立了熒光定量PCR法,以常規PCR產物為標準品,建立標準曲線.結果表明,標準曲線Ct值檢測范圍為12.07-32.72,相關系數為0.999,擴增效率為96.4%.建立的'GABRA1TaqMan探針實時熒光定量方法具有線性范圍廣、擴增效率高、檢測時間短、敏感性高等特點.

作 者：李寧 何進宇 刀筱芳 伍學英 龔玉來 馮文 高利民 徐亞歐 LI Ning HE Ji-yu DAO Xiao-fang WU Xue-ying GONG Yu-lai FENG Wen GAO Li-min XU Ya-ou ?作者單位：李寧,刀筱芳,徐亞歐,LI Ning,DAO Xiao-fang,XU Ya-ou

何進宇,伍學英,龔玉來,馮文,高利民,HE Ji-yu,WU Xue-ying,GONG Yu-lai,FENG Wen,GAO Li-min

刊 名：西南民族大學學報（自然科學版）? ISTIC英文刊名：JOURNAL OF SOUTHWEST UNIVERSITY FOR NATIONALITIES?年，卷：?34?分類號：Q7 R74?關鍵詞：GABRA1 ??TaqMan探針 ??實時熒光定量PCR ?

篇8：實時熒光定量PCR研究進展及其在中藥領域的實踐的論文<\/h2>

1993 年，Higuchi 等人將PCR 技術和封閉式檢測相結合，對目的核酸數量進行定量分析，提出了熒光定量PCR 技術的概念。1995 年美國PE 公司成功研制了TaqMan 技術，1996 年又推出了首臺熒光定量PCR 檢測系統，通過檢測每個循環的熒光強度，并使用Ct值進行分析，達到定量核酸的目的，自此Real-Time PCR 技術才得以真正的推廣和應用。到目前為止，實時熒光定量已被廣泛應用于基礎科學研究、臨床診斷、疾病研究及藥物研發等科學領域。

1 原理

Real-Time PCR 是在PCR 反應體系中加入熒光物質，利用熒光信號對整個PCR 進程進行實時監測，從而達到對未知起始模板進行定量分析的目的。它是一種將酶動力學、核酸擴增、光譜分析和實時檢測技術相結合的技術。隨著PCR 反應的進行，反應產物不斷累積，熒光信號強度也等比例增加。每經過一個循環，收集一個熒光信號，這樣就可以通過熒光信號強度變化實時監測PCR 產物量的變化，從而得到一條描述PCR 動態進程的曲線，即擴增曲線。

實 時熒光定量PCR 擴增曲線可以分為4 個階段: 基線期、早期指數期、對數-線性期和平臺期，見圖1。在基線期 ，擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋，無法判斷產物量的變化; 早期指數期，熒光信號超過背景信號并到達閾值 ，此時循環數稱為Ct 值或Cp 值，Ct值與模板起始濃度的對數值成反比線性關系，因而Ct值可被用來定量模板起始濃度; 對數-線性期，在理想反應條件下每經歷一個循環，PCR 產物加倍;平臺期，擴增產物已不再呈指數級的增加，PCR 的終產物量與起始模板量之間沒有線性關系，所以根據最終的PCR 產物量不能計算出起始模板拷貝數。實時熒光定量PCR 能準確地確定初始模板拷貝數，結果重現性好，誤差小，與常規PCR 在終點定量上相比更具重要意義。實時熒光定量PCR 結果不僅可以定性 ，還可定量 ，而常規PCR 只能做到半定量。另外，實時熒光定量PCR 的反應和檢測都是在封閉的反應管中進行的，樣品污染幾率大大降低，無需擴增后的實驗操作，大大節省了實驗時間，提高了實驗效率。

2 Real-Time PCR 定量類型

實時熒光定量分析包括絕對定量和相對定量。絕對定量是對未知樣品絕對拷貝數進行測定的方法;相對定量不是測定樣品的絕對拷貝數，而是比較樣品之間同一目的基因的相對表達量，以期分析樣品之間目的基因的表達差異。

2. 1 絕對定量

絕對定量是使用一系列已知濃度 的標準品繪制標準曲線，建立Ct值與起始模板量[總核糖核酸 或脫氧核糖核酸 ] 的對數值之間的線性關系，達到對未知樣品絕對的定量。標準曲線的繪制首先是標準品的選擇，標準品可以是DNA 或RNA 。但是為了保持與待測樣品間擴增效率的一致性，標準品應盡量選擇與待測樣品結構近似的樣品，該方法要求梯度稀釋的標準品都必須與待測樣品同時平行擴增，且待測樣品濃度應包含在已知標準品濃度范圍之內。

2. 2 相對定量

相對定量解析方法相對復雜，一般用于基因表達分析。根據選用的標準不同可分為以質量單位為標準的相對定量和以內參基因為標準的相對定量。以質量單位 作為標準的相對定量優點是實驗設計概念簡單，數據分析處理簡單易學，缺點是很難準確量化初始材料; 而以內參基因作為標準的相對定量優點是能準確量化初始材料的載量，尤其當初始材料受限時，進行相對表達分析十分方便。缺點是要求得到一個或多個在所有待測樣本中恒定表達的內參基因。目前，使用較多的是以內參基因作為標準的定量方法。

2. 2. 1 內參基因的穩定性評價為了確保定量結果的可靠性和準確性，在qRT-PCR 中需選擇合適的內參基因對不同樣品之間因質量、RNA 的提取效率以及反轉錄效率不同所產生的差異進行校正，從而實現對不同樣品中RNA 的定量和數據歸一化。理想的內參基因應滿足以下條件: 1) 在不同發育階段和不同組織器官中表達穩定; 2) 表達不受生物學、實驗條件的影響; 3) 其穩定的表達水平與目的基因表達水平相近。在植物qRT-PCR 研究中用的最多的內參基因通常是看家基因 ，然而越來越多的研究表明，看家基因在不同類型細胞和不同生理狀態下的表達并不是恒定不變的，若盲目選擇看家基因作為內參，可能會導致基因表達分析結果不準確，甚至得到相反的或者錯誤的結論。因此選擇合適的、穩定的內參用于基因表達的差異分析非常關鍵。目前，geNorm、NormFinder、BestKeeper、DeltaCT等分析方法被廣泛用于內參基因的篩選與評價。Xie 等將上述4 種方法整合成一個在線的分析工具—RefFinder，用于各種實驗條件下內參的篩選，避免了單個分析方法的片面性。

2. 2. 2 引物的特異性及擴增效率的檢測為了使結果準確可靠，qRT-PCR 中還要求引物的特異性好，擴增效率接近100%。劉正霞等研究顯示，引物的特異性和擴增效率對定量PCR 結果分析有顯著影響。

引物的特異性評估: 引物的特異性可以通過凝膠電泳、PCR 產物克隆測序以及qRT-PCR 的熔解曲線來檢查。凝膠電泳的條帶若為單一條帶，則說明PCR 產物特異性好，若有多條則說明特異性差，需要優化PCR 反應條件和體系或重新設計引物; PCR產物克隆測序結果在去除載體序列后與原序列進行比對，分析測得的序列是否位于上下游引物之間;在qRT-PCR 中，可以通過熔解曲線來判斷引物的特異性，若熔解曲線為單峰則說明引物的特異性好。通過上述3 種方法均可以對設計的引物進行特異性檢測，以便篩選特異性較好的引物進行后續實驗。擴增效率的計算: 相對定量結果的準確性還受到目的基因和內參基因的PCR 擴增效率影響。一般來說，擴增效率接近100%是優化實驗使得結果重復性好且可靠的最好標志。實際操作時，反應的擴增效率應該在90% ～ 105%之間，如果擴增效率低，可能原因是引物設計不佳，或是反應的條件沒有優化;擴增效率大于100%時，可能的原因有非特異性產物擴增，如引物二聚體、錯配等引起的PCR 產物產生。傳統計算擴增效率的方法是將已知模板稀釋成一系列梯度濃度 ，并進行實時熒光定量PCR 實驗，利用拷貝數的對數值和Ct值建立標準曲線。評價標準曲線的優劣有兩個指標，相關系數 和斜率。相關系數反映標準曲線的直線性，越接近1 說明直線性越好，定量越精確; 斜率與擴增效率相關，計算公式: 擴增效率 = 10 - 1。在PCR 過程中，擴增效率在指數期相對穩定，但是隨著循環數的增加，Taq 酶、脫氧核糖核苷三磷酸 、引物，甚至DNA 模板等各種PCR 要素逐漸不敷需求，擴增效率也就越來越趨向于0。通過標準曲線得出的擴增效率不能反映PCR 進程中擴增效率的變化。由于PCR 結果往往是通過Ct值來計算的，由擴增效率引起的最終差異只能反映在Ct值上的變化。

為了減小這種情況引起的誤差，在定量時確保各樣品濃度值在一系列梯度濃度的范圍內，即Ct值在標準曲線范圍內。此外，尚有根據PCR 進程中的原始數據或擴增曲線的形狀，再基于不同的數學算法開發出來的一些軟件來計算擴增效率的。這些算法或軟件使得擴增效率的計算更加簡單易行，特別是對于那些表達量很低的基因很難通過一系列的梯度稀釋來求擴增效率。該方法缺點是不同軟件基于的算法不同，因此各軟件得到的結果也有差異; 噪音導致可用的數據點很有限，計算的擴增效率也就不精確。

2. 2. 3 數據處理方法對于不同的實驗需求，我們可以采用不同的方法進行實驗設計和數據分析，在這里只討論以內參基因為標準的相對定量方法。常用的方法有雙標準曲線法、2-△△Ct法、用參照基因的△Ct法和Pfaffi 法，應用每種方法必須對應適應的條件。雙標準曲線法: 首先分別對目的基因和看家基因的5 個 濃度梯度稀釋的標準品制作兩條標準曲線。各待測樣品與標準品同時進行反應，得到目的基因的Ct值，分別代入目的基因的標準曲線，得到看家基因的Ct值，分別代入看家基因的標準曲線，這樣就可以換算出各待測樣品目的基因和看家基因的起始模板量。其次，利用內參對各待測樣品進行歸一化，即用目的基因的定量結果除以看家基因的`定量結果。最后對不同樣品之間目的基因的表達量進行比較，通常將對照樣品的表達量作為1，計算出相對量，再進行樣品間相對量比較。2-△△Ct 法: 2-△△Ct 法是定量PCR 實驗中分析基因表達相對變化的一種簡便方法，但條件是目的基因和內參基因擴增效率都接近100%，且相互間效率偏差在5% 以內，否則會產生較大的誤差。

使用2-△△Ct 法之前，必須驗證目的基因和內參基因的擴增效率。其操作步驟如下: 首先，對所有的待測樣品和對照樣品，用內參基因的Ct值歸一化目的基因的Ct值: △Ct = Ct - Ct ; 其次，用對照樣品的△Ct值歸一化待測樣品的△Ct值: △△Ct =△Ct -△Ct ; 最后，計算表達水平比率: 表達量的比值= 2 -△△Ct。如果目的基因和內參基因有同樣的擴增效率，但是擴增效率不等于2，那么2 -△△Ct 法的公式可以修正為用實際擴增效率值代替等式中的2。如果目的基因和內參基因擴增效率不相近，可以優化或重新設計實驗。用參照基因的△Ct法: 用參照基因的△Ct法是2 -△△Ct法的一種變化形式，它更容易掌握且結果相同。與2 -△△Ct得到的△Ct值相比，△Ct法是每個樣本之間參照基因與目的基因的Ct值的差值。雖然這種方法的操作步驟簡單，但同樣也能真實衡量基因表達水平，將參照基因的表達水平計算在內。結果顯示，主要的差異是校準樣本的表達水平不是1。如果用這個方法得到的表達值除以所選的校準樣本的表達值，計算結果與2 -△△Ct 法的結果正好相同，即表達量的比值= 2 -△Ct )Pfaffi 法: 當目的基因和內參基因的擴增效率相近時，用2 -△△Ct法定量相對基因表達是最合適的方法，但是如果兩個擴增子擴增效率不同，必須選擇另一種方法來確定不同樣本之間目的基因的相對表達量。Pfaffi 法則是目前最好的選擇方法，計算公式為:表達量的比值= C /D 。

2. 2. 4 歸一化歸一化是對所有樣品之間的差異進行校正。不同的樣品，即使反應時使用相同量的總RNA，但因細胞來源不同，RNA 總表達量并非一致。因此僅僅將反應時RNA 量統一，起始的細胞數也不一定相同。其實在進行表達量分析時，比較的是相同數量細胞中的某個基因拷貝數目。實際上要將樣品材料統一到相同細胞數提取是非常困難的，同時還不能保證RNA 提取效率、反轉錄效率以及PCR 擴增效率完全相同?；谏鲜鲈颍谶M行表達量分析時，有必要選擇內參基因對所有樣品進行歸一化處理，以獲得目的基因特異性表達的真正差異。

篩選出穩定的內參基因后，先對目的基因歸一化處理，然后進行表達差異分析。目前進行歸一化分析的方法有兩種: 單基因歸一化和多基因歸一化。實時熒光定量最早被用于基因表達差異分析時，大多文獻報道都是以單個基因作為內參基因，對目的基因的表達量進行歸一化。然而，基于單一內參基因進行歸一化存在許多缺點，可能導致比較大的誤差。因此，多個看家基因開始被應用于歸一化分析中。

3 在中藥領域中的應用

3. 1 基因表達分析

熒光定量PCR 最普遍的應用是基因表達分析。從基礎科學研究到實際應用，檢測基因表達都是基本的也是很重要的一項工作。Olofsson 等對黃花蒿不同組織中萜類代謝途徑上的基因進行表達差異分析，為評估青蒿素的前體對青蒿素產量的影響提供科學參考。植物在生物和非生物脅迫下，基因表達水平的相對變化與次生代謝產物累積相關性的研究越來越受到科研工作者的青睞。如Cheng 等用YE、Ag + 和MeJA 3 種誘導子組合誘導丹參毛狀根。結果發現，在處理24、36 h 后，SmCPS 的表達量顯著上調，次生代謝產物隱丹參酮和二氫丹參酮Ⅰ的含量也隨之顯著上升，這表明丹參酮類化合物含量的升高可能與SmCPS 基因表達量的上調有關。在植物的不同發育階段，其次生代謝產物的累積量及基因的表達水平也會不同。如Kim 等對人參在葉片不同開放期 其體內人參皂苷及生物合成途徑上的關鍵酶基因進行檢測。結果顯示，在中間階段和全開放階段人參皂苷生物合成途徑上的酶基因PgSS 和PgSE 的表達量比閉合階段增加約1. 5 倍，PgDDS 的表達量則增加4 倍以上; 主根和側根中，人參皂苷的含量在葉片開放的中間階段達到最大值，而葉片中人參皂苷的含量在全開放階段達到最高。此外，實時熒光定量的差異表達分析在中藥領域得到廣泛應用，如在甘草、黃花蒿等藥用植物中都有大量的研究。

3. 2 中藥品種及真偽鑒別

中藥的真偽直接影響臨床用藥的準確性和中藥的質量，因此對于中藥品種真偽的鑒別歷來是中藥研究中極為重要的工作。Xue 等依據骨碎補的正品及其混淆品trnLtrnF間隔序列，設計Scorpion 探針，通過實時熒光定量對骨碎補的真偽進行鑒別，同時對多個混合樣品建立標準曲線，以分析正品中混淆品的摻入量。另外，Xue 等基于升麻及其替代品之間內轉錄間隔區 序列的長度、鳥嘌呤 、胞嘧啶 含量的差異，采用LightCycler 定量儀擴增升麻及其替代品的ITS 序列，并分析各產物的熔解曲線。通過解鏈溫度的差異區分鑒別升麻及其替代品，為快速、穩定鑒別升麻及其替代品建立了標準。董玉茹等將限制性內切酶引入熔解曲線分析中，建立了一種新的單核苷酸多態性 分型方法，成功實現了對金銀花與山銀花、白術與蒼術品種及真偽的鑒別。此外，有研究者基于實時熒光定量PCR 技術，分別對鐵皮石斛近緣種冒充鐵皮石斛以及三七粉摻假等現象建立快速的檢測方法。

植物在生長、發育及受外界環境刺激等過程中，其基因在不同時空的表達存在著很大差異。對基因的表達量進行差異分析，是了解生物體生長、發育和調控等機理的一個重要內容。Northern 雜交、Southern 雜交和原位雜交等都可以用來進行目的基因的定量分析，但這些方法耗時且敏感性較差。普通PCR 終點定量的缺陷是擴增出來的DNA 產物需要通過瓊脂糖凝膠電泳、溴化乙錠 染色后才可以顯示出來，這些步驟耗時且不易精確定量。此外，由于酶動力學的特點，在PCR 反應進程中有基線期、早期指數期、對數-線性期和平臺期，理論上來說，所有樣本的DNA 擴增量最后是相同的，但實際上，不同樣本的平臺期是不一樣的。在這種情況下，通過終點定量分析，反而將反應效率中很小的差別放大出來，造成定量的不準確。實時熒光定量為起始定量，誤差相對較小，這使其在定量方面得到快速的發展。PCR 產物長度或組成不同，其熔解曲線 也存在差異，因此可根據熔解曲線的差異進行物種的鑒別。中藥鑒定要解決其中一個很重要的問題就是真偽。實驗過程中，我們可通過設計特異性引物來擴增不同的樣品，從而得到不同的PCR 產物，再根據相應的熔解曲線鑒定中藥材的真偽和摻偽的中藥材。此外，實時熒光定量PCR 還可廣泛用于等位基因分析及轉基因生物檢測等。

實時熒光定量PCR 自建立以來，發展迅速、應用廣泛，擁有許多優點。近年來，許多科研工作者基于實時熒光定量PCR 的基本原理對其進行不斷地研究和改進，使實時熒光定量PCR 得到了進一步的完善。隨著實時熒光定量PCR 的不斷標準化，該技術將在生物學、醫學基礎研究等科研領域中得到更加廣泛的推廣與應用。