一。醫學技術：讀完這一章，我突然發現我選擇的專業可能是最接近我理想的。

當今的醫療技術，就是運用大型器材來醫治各種疾病，但是把醫療的大部分錢都花在器械的改進上卻是喧賓奪主的行為，看肺結核的**進程就知道了，這種過去難以**，花費高昂卻一籌莫展的疾病在生物學家發現其致病機理和發現抗生素后一切都迎刃而解了?！罢嬲尼t療高技術，是從對于疾病機理真正理解得來的，而一旦可行，它就比較經濟，比較容易施予”我一直一來認為真正合格的醫生是能夠熟練運用機械然后**很多人，但是我通過這本書意識到什么叫真正的技術高超?，F今大部分的醫療技術都是維持現狀的醫療，只是幫助你死的不那么早，但卻不能避免死亡。

**的高成本只有幾個月甚至十天。真正高科技的醫療應該是預防，這樣人類才不會感染這種疾病，比如瘧疾和瘟疫，我們戰勝了兵法云：知己知彼才能百戰不敗。

而了解對方的艱巨任務完全落在我們的基礎科學研究人員身上?；A科學是我們解決一切問題的基礎，應把培養基礎科學人才作為我國的重點培養對象。我很慶幸能夠選到這個基礎科學專業，雖然難以就業，雖然比起工科要清苦得多，但想到自己將來要做的研究可能推動醫學領域的巨大進步，內心覺得使命重大而任務艱巨了。

2.生物拯救世界？！許多研究生物學的人可能不明白為什么人類如此熱衷于互相殘殺。

看看我們的身體。我們的身體真的是我們自己的嗎？大多數生物學家認為線粒體，我們賴以生存的atp的制造者，來自早期異養小原核生物的和平共處。在你身體里每時每刻不停呼吸的是小小的入侵者，它保持著大半的獨立，還借用你的核基因幫它制造蛋白質，然后自行**，呆得安安穩穩，不亦樂乎。

所以你是你，但你并不是你。我們連多年前的小小寄生者線粒體都欣然容納，卻對同族自相殘殺。這不是很奇怪的事么？

事實上，生物之間的合作與融合是自然界不可阻擋的趨勢。“抗體的創生，來自共生所需的早期感覺機制，可能用于避免共生活動的失控。所有的攻擊和防御只是進化過程的分支。它們是協調共生關系，防止進化過程失控的必要條件。

”要是他們知道他們的細胞是許許多多遠古小生物共生得來的，他們就會覺得發動戰爭是多么愚蠢的事了，這算是生物拯救世界的另一個例子么？

3.交流的重要性：從生物的角度說：

如果單獨培養一個細菌，它會很快死亡。如果蜜蜂的數量不超過15只，它們就會不吃不喝就死去。所有的生物都害怕孤獨。它們必須和同伴待在一起才能好好生活。人們也是。群體的力量是巨大的，威廉.莫頓.

惠勒有一個“超有機體”的觀點，即“群體的社會性昆蟲在某種意義上相當于龐大的，多生命組成的生物。這些生物具有一種集體智慧和善于適應的天性，這種智慧和適應力遠遠高于個體總和?！币虼宋覀円匾暭w的力量。

在書中，作者把地球看作一個巨大的細胞，一個統一的生命體，所有生物都像一個細胞器一樣履行自己的職責，使整個地球運轉良好，不斷自我更新。從科學的角度說：齊曼在《自然》雜志上說“發明是一種機制，把科學研究工作獲得的片片斷斷知識系統地公布于世。

”開始時，科學上的探索是孤獨的，靜思的事，后來就需要交流。很多劃時代的發現是由很多科學家在前邊鋪路，沃森和克里克的發現并不是他們兩個人的成就，如果不是之前那位化學家精確地確定了atgc的含量，他們不會有如此的成就。所以我們在生活中，在科研上都要重視交流，要相信群體的力量。

4.無為即是有為：作者在書里有一個絕妙的例子，如果給你完全地控制一只手，你會發現你無所適從，你會不知道手指如何移動到杯子旁然后適當地彎曲并抓起杯子，還有用正確的力度寫字，一切看起來尋常的事情都會變得艱難，所以你不如你的手了解你的手。

真正的射擊高手就是用手射而不是用腦射。老子說出了一句真理，無為即是有為。

第七篇 干細胞讀后感

這本書吸引我的地方是作者對生命，社會的新奇思考，其中最主要探討的是人的社會性和自然發展的'趨勢。比起作者的思考，我更加欣賞本書的文風，因為這本書像是一本散文集，作者像是隨筆一樣寫出自己對這個世界的非凡思考，奔放不羈，無論是想法還是文風。

作者是生物學家又是散文家，有些地方寫得有些不易理解，在這里我就講一篇我認為有意思的片段，當然里面也蘊涵著非凡的思考。《一個誠懇的建議》篇，他諷刺用計算機找朋友的方法，用寄生在白蟻消化道的一種原生生物和白蟻互相賴以生存的例子作為論據，但是看起來這例子和要說的事風牛馬不相及。作者在文中提了一句“有一種潛在的力量，驅使幾種生物湊在一起，”這種潛在的力量就是自然的力量，那這些生物都有可能被創出來。書名叫《細胞生命的禮贊》，可能在此有些體現。

最后我說說他的文風，也很吸引我。他的文章就像在和老朋友聊天一樣，平淡而有風趣。

第八篇 干細胞讀后感

捐獻造血干細胞是愛的奉獻和救人善舉。造血干細胞移植是治療白血病等疾病的有效手段，建立造血干細胞捐獻者資料庫是這種治療手段必備的輔助支持系統。凡年齡在18-45歲的符合無償獻血條件的健康者均可登記成為捐獻造血干細胞的志愿者，18-55歲健康者可采集造血干細胞。如果您適齡、身體健康(符合無償獻血條件)、志愿捐獻造血干細胞，可與鳳慶縣紅十字會聯系報名、填寫志愿捐獻書及有關表格，并抽取6～8毫升血液，組織配型實驗室將會對您的血液進行HLA分型等檢驗，并把您的所有相關資料錄入中國造血干細胞捐獻者資料庫的計算機數據庫中。這樣您就成為捐獻造血干細胞的志愿者了。如果您被患者檢索配型成功，將再采集8-10毫升血樣進行高分辨檢驗，高分辨檢驗相合，體檢合格，患者可以接受移植，就可以實現捐獻。

在此，我們呼吁：獻出您的愛心，加入造血干細胞捐獻志愿者的行列，有您的加入就可以給白血病患者，提供一次生存的機會!

捐獻造血干細胞、拯救生命、無損健康 。

聯系人：楊老師、高老師。

電話：0883-4219178

手機號：18088330182(高老師)

9月30日

第九篇 干細胞讀后感

發現一種提取液能促進體細胞向干細胞轉變將在再生醫學研究中有重要的意義。有文獻報道動物的卵細胞提取液能重新編程體細胞，包括豬的卵細胞[1]和非洲爪蟾的卵細胞[2,3]提取液都能使體細胞核重編程。在這個研究中，我們用雞蛋白提取液作用于不同細胞，共培養 3 d 后，收集細胞，送公司做干細胞蛋白芯片檢測，現將研究報道如下。

1 材料與方法

1. 1 細胞來源 4 種細胞為我們實驗室經常培養的細胞，C57 小鼠的骨髓間充質干細胞（ C57-BMSC）（ 自己制備） ,樹鼩的臍帶間充質干細胞（ TS-UC-MSC） （ 自己制備） ,293T 細胞 （ 購自中國科學院昆明細胞庫） 和 GFP 慢病毒轉染成功的 293T 細胞（ 293T-GFP） （ 自己轉染成功） .

1. 2 雞卵清提取液的制備 取幾個雞卵，無菌分離卵清和卵黃，卵清按 1∶ 1 加裂解液，充分攪勻，存放于 -20℃。凍融 3 次后，離心，取上清，4℃保存。裂解液配方： 50 mmol/L NaCl,5 mmol/L MgCl2,100mmol / L HEPES,pH8. 2,1 mmol / L 二 硫 蘇 糖 醇（ DTT） ,0. 1 mmol/L 苯甲基磺酰氟（ PMSF） 和蛋白酶抑制劑。由此得到的提取液為雞卵清提取液。獲得的提取液用 50% 的終濃度與 293T 細胞共培養 3d,然后用定量 PCR 的方法檢測細胞多能基因 OCT4和 NANOG 與對照（ 培養基培養） 相比明顯升高，即為質控指標合格，可用于下面的實驗。

1. 3 干細胞蛋白芯片檢測步驟 每個芯片孔中加入 100 μl 的` 1 × 封閉液，室溫搖床上孵育 30 min,避免產生氣泡； 抽去封閉液，每個孔中添加 100 μl 樣品，一個陣列一個樣品； 4 ℃ 振蕩過夜孵育。使用Thermo Scientific Wellwash Versa 芯片洗板機清洗玻片，每孔加入 70 μl 生物素標記抗體； 室溫震蕩孵育1 ~ 2 h,清洗，每孔加入 70 μl 的 1 500 倍稀釋的熒光劑-鏈霉親和素，用密封條貼住玻片，然后用鋁箔紙包住玻片避光室溫震蕩孵育 1 ~2 h.清洗，采用激光掃描儀例如 Axon GenePix 掃描信號。采用芯片分析軟件提取數據，對于 Fold change,選取大于1. 5 為有統計學意義。

1. 4 Western blot 檢測多能標志蛋白 OCT4 和NANOG 兔抗人 OCT4 多克隆抗體購自 Immunoa-way 公司，鼠抗人 NANOG 單克隆抗體購自 Millipore公司，二抗均購自碧云天生物技術有限公司。293T細胞在 6 孔板中，一孔加培養基，一孔加 50% 終濃度的雞蛋白提取液，共培養 3 d 后，用碧云天的 IP細胞裂解液提細胞蛋白，取 50 μl 細胞蛋白液加 10μl 6 × 的上樣緩沖液，100℃ 水浴 5 min,上樣 20 μl,進行 SDS-PAGE 電泳，電泳結束后，100 v 電壓轉膜1 h,膜用 5% 脫脂奶粉的 TBS 封閉 37℃ 1 h,將一抗1∶ 250 稀釋于 2% 脫脂奶粉的 TBS 中，37℃ 振搖 1 h,TTBS 洗 3 次，每次 5 min,二抗 1∶ 200 稀釋于 2% 脫脂奶粉的 TBS 中，37℃振搖 1 h,TTBS 洗 3 次，每次5 min,ECL 顯色，用 Tanon 的化學發光成像儀檢測發光條帶。

2 結果

2. 1 C57-BMSC 有 3 個蛋白發生了統計學意義的改變 SOX17、BMPR-1A 和 NANOG 是干細胞中表達的蛋白，當體細胞向干細胞轉變后細胞中這幾個蛋白的表達升高，我們用 50% 終濃度的雞蛋白提取液與 C57-BMSC 共培養 3 d 后，這幾個蛋白的表達明顯升高，說明 C57-BMSC 又向更多能的干細胞分化了，見圖 1.

2. 2 TS-UC-MSC 有 1 個蛋白發生了統計學意義的改變 BMPR-1A 是干細胞多能性的標志，TS-UC-MSC 用 50% 雞蛋白提取液共培養 3 d 后，與未加雞蛋白提取液培養的細胞相比，BMPR-1A 明顯升高，說明細胞又向多能干細胞的方向分化了，見圖 2.

2. 3 293T 有 1 個蛋白發生了統計學意義的改變BMPR-1A 是干細胞多能性的標志，293T 細胞是標準的體細胞株，用50%雞蛋白提取液共培養3 d 后，BMPR-1A 表達明顯升高，說明 293T 細胞有向干細胞轉變的現象發生，見圖 3.

2. 4 293T-GFP 有 1 個蛋白發生了統計學意義的改變 OCT4 是干細胞多能性的標志，293T-GFP 用50% 的雞蛋白提取液共培養后，對比培養基培養的細胞 OCT4 的表達明顯增加，說明細胞有向干細胞轉化的現象。

2. 5 293T 細胞 OCT4 和 NANOG 蛋白的 Westernblot 結果（ 圖 5） OCT4 和 NANOG 蛋白是干細胞多能性的標志，293T 細胞用50%的雞蛋白提取液共培養后，OCT4 和 NANOG 蛋白的表達量明顯增加（ 圖5 和表 1） ,與對照組（ 培養基培養） 相比有統計學意義（ P<0. 05,n =3） .

3 討論

SOX17、BMPR-1A、NANOG 和 OCT4 是干細胞中表達的蛋白，在細胞轉化為多能的干細胞時，這幾個蛋白的表達明顯升高。因此，這些蛋白在細胞中表達明顯升高時，可以認為細胞向多能的干細胞發生了轉化。我們用共培養法發現加了 50% 雞蛋白提取液的細胞有一些干細胞蛋白表達明顯升高，而現在用卵細胞提取液誘導體細胞核重編程的方法，通常用可逆滲透法，即先用鏈球菌溶血素 O（ SLO） 在細胞膜上打孔，再用卵細胞提取液滲透，最后再用氯化鈣再封合細胞膜上的孔，是否這種方法誘導效率更高，需要今后的實驗進一步深入研究。

我們在實驗中用了 4 種細胞，C57 小鼠的骨髓間充質干細胞（ C57-BMSC） 、樹鼩的臍帶間充質干細胞（ TS-UC-MSC） 、293T 細胞（ 購自中國科學院昆明細胞庫） 和 GFP 慢病毒轉染成功的 293T 細胞（ 293T-GFP） ,用 50% 的雞蛋白提取液共培養 3 d后，均檢測到了干細胞相關蛋白表達的升高，說明了雞蛋白提取液有誘導細胞向多能干細胞轉變的現象，因為多能標志蛋白有意義地升高了。

對比豬卵提取液和蟾蜍卵提取液，雞蛋白提取液獲取更方便，獲取量更大，提取過程注意無菌操作，獲得的雞蛋白提取液無須過濾除菌就可用于細胞培養，有較大的應用價值。在我們以前的研究中，發現雞蛋白提取液有促細胞增殖的作用[4,5],還有促進多能因子 OCT4 和 NANOG 升高表達的作用[6,7],因此在本研究中我們進一步應用干細胞蛋白芯片檢測更多的多能因子，同時使用 4 種細胞，都檢測到其中多能因子的升高表達，C57-BMSC 有SOX17、BMPR-1A 和 NANOG 這 3 個蛋白發生了統計學意義的改變，TS-UC-MSC 有 BMPR-1A 蛋白發生了統計學意義的改變，293T 有 BMPR-1A 蛋白發生了統計學意義的改變，293T-GFP 有 OCT4 蛋白發生了統計學意義的改變，進一步驗證了雞蛋白提取液有誘導體細胞向多能細胞轉變的作用。

由于 C57-BMSC 和 TS-UC-MSC 是間充質干細胞，它們經過誘導后多能因子進一步升高表達，是否證明了雞蛋白提取液含有某些逆向分化細胞的特殊物質，以及這些物質的鑒定和分離提取還有待實驗進一步驗證。

參考文獻：

[1] Miyamoto K,Tsukiyama T,Yang Y,et al. Cell-free extracts frommammalian oocytes partially induce nuclear reprogramming in so-matic cells[J]. Biol Reprod,2009,80（ 5） : 935-943.

[2] Hansis C,Barreto G,Maltry N,et al. Nuclear reprogramming of hu-man somatic cells by xenopus egg extract requires BRG1[J]. CurrBiol,2004,14（ 16） : 1475-1480.

[3] Miyamoto K,Furusawa T,Ohnuki M,et al. Reprogramming eventsof mammalian somatic cells induced by Xenopus laevis egg extracts[J]. Mol Reprod Dev,2007,74（ 10） : 1268-1277.

[4] 阮光萍，王金祥，劉菊芬，等 . 雞卵清提取液中小于 3kDa 的成分有促細胞增殖的作用[J]. 中國細胞生物學學報，2014,36（ 10） : 1350-1354.

[5] 阮光萍，王金祥，龐榮清，等 . 雞卵細胞提取液有維持和增強細胞活性的關鍵作用[J]. 中國細胞生物學學報，2013,35（ 6） : 804-809.

[6] 阮光萍，王金祥，姚 翔，等 . 雞卵提取物促進 293T 細胞升高表達多能基因 OCT4 和 NANOG[J]. 中國細胞生物學學報，2014,36（ 2） : 190-194.

[7] 阮光萍，姚翔，劉菊芬，等 . 雞卵清提取液中大于 3ku 蛋白促細胞升高表達多能基因 Oct-3/4 和 Nanog[J]. 中國組織工程研究，2014,18（ 37） : 6029-6033.

第十篇 干細胞讀后感

【關鍵詞】 胚胎干細胞; 神經細胞; 分化

Progress in directed differentiation of mouse embryonic stem cells into neural cells

【Abstract】 Mouse embryonic stem cells can give rise to ectodermal derivatives in culture and can be further induced into neurons and glia for cell-replacement therapies in the central nervous system and for use in drug discovery. The methods of directed differentiation of mouse embryonic stem cells into neural cells include neural differentiation from embryonic stem cells via embryoid bodies, stromal cell induced neural differentiation, default model mediated neural differentiation, adherent monoculture induced neural differentiation, genetic engineering mediated neural differentiation and so on. Here we review these methodologies.

【Key words】 embryonic stem cell; neural cell; differentiation

小鼠胚胎干細胞于1981年首次由Evans和Kaufman［1］成功分離建系，它們來源于胚泡的內細胞團（inner cell mass , ICM），這些細胞具有穩定的二倍體核型，在體外可以分化為三個胚層的多種細胞。將小鼠胚胎干細胞重新植入胚泡可以參與形成胚胎。體外ES細胞維持未分化狀態依賴于一些細胞因子的存在，如白血病抑制因子（leukemia inhibitory factor , LIF）［2］。撤去這種自我更新的刺激信號后，ES細胞很快分化為多種細胞。這些屬性使ES細胞成為非常有用的發育生物學和功能基因組學研究的生物系統［3］。

1 擬胚體（embryoid bodies, EBs）內神經細胞的分化

小鼠ES細胞通過擬胚體分化為神經細胞主要有以下兩種方案。

1.1 “4-/4 方案”［4］ 將小鼠ES細胞無LIF培養4天，形成EB；再用維甲酸（retinoic acid, RA）處理4天，然后在明膠（gelatin）［5］或層粘連蛋白（laminin）［4］包被的組織培養皿上培養［6］。培養6天后，細胞出現明顯的神經細胞形態，開始表達神經細胞特異的基因，如神經微絲輕鏈（neurofilament light chain）、微管相關蛋白2和5（MAP2、MAP5）等。這些細胞對一系列神經遞質和去極化電流起反應，證實了它們是可以傳遞興奮的神經元。這一方案還會分化出神經膠質細胞，多數為星形膠質細胞，但也有少突膠質細胞的存在［7］。RA是一類促神經生長因子，不僅對多潛能干細胞有誘導作用，對神經前體細胞也有促進增殖、成熟的作用。RA與受體RAR、RXR結合，后者活化后與RA反應元件（RARE）結合，激活神經細胞相關基因并抑制中胚層相關基因的轉錄［8］。Wiles 等人的實驗表明RA通過激活抑胰蛋白（follistatin）抑制骨形態形成蛋白（bone morphogenetic protein, BMP）而使小鼠ES細胞向神經細胞方向分化［9］。

該方案時間短、成本低，是目前使用較為廣泛的神經細胞誘導方法。其不足之處是EB的外層細胞先分化而內層細胞仍保持未分化狀態, 分化不均一，得到的細胞種類復雜，不利于純化。

第十一篇 干細胞讀后感

每個人都有自己的夢想，也曾追求過夢想。今天我看了《偉人細胞》這篇文章，讓我更深刻地了解了怎樣才能更好的追求，實現夢想

這篇課文的主人公是賈里，主要介紹了賈里想成為偉人這一夢想的四件事。偉人計劃一是教訓邱士力；二是追求矮個風度 ;三是打工計劃。 雖然前三次打工計劃都失敗了。但是“有意栽花花不發，無心插柳柳成蔭”，他因不怕吃虧，要了一本有些破損的書而轟動全校，受到了老師的表揚，獲得了意外成功。

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哎，想想自己以前，也像賈里一樣。想成為怎樣怎樣的作家，說要寫小說，才寫幾句話就沒興趣寫了，便把買回的參考書，寫作本子丟在了一邊，只有幾分鐘的熱度。過了一陣子又想當生物學家，買了個顯微鏡和一些實驗器材，整天托著顯微鏡東瞅瞅，西瞧瞧，拿著酒精燈，燒杯燒這個，看那得，弄了半天也沒搞出什么驚天動地的大發現?，F在再想想，那些作家不都是靠著勤奮和堅持，靠著一點一滴的積累才走上成功之路的？才走向人生的輝煌的？

偉人好比金剛石，一般人是石墨，那么他們的共同之處都是碳元素。由一般的普通人鍛煉成為偉人，猶如石墨加工成金剛石，只有巨壓和高溫才能達到標準。我們不能好高騖遠，不切實際地盲目地追求夢想，只有腳踏實地，從小事做起，從一點一滴做起，才能成就一番偉大的事業。

第十二篇 干細胞讀后感